2022年3月24日是第27个世界防治结核病日。今年国家卫生健康委的宣传主题是：生命至上、全民行动、共享健康、终结结核。

什么是结核分枝杆菌？

结核病是由结核分枝杆菌引起的慢性传染病。结核分枝杆菌，简称结核杆菌，是引起人和动物结核病的病原体，它可以侵犯全身各器官，引起结核病，以肺结核最为多见。结核分枝杆菌，是1882年由德国微生物学家郭霍发现的。在显微镜下，结核杆菌为细长稍弯曲或直的杆菌，单个散在，呈V、Y形，或条索状、短链状排列。

我院作为结核病的定点治疗单位，开展了多项关于结核分枝杆菌的实验室检查。

结核分枝杆菌的实验室检查有细菌学检查、免疫学检查、分子生物学检查。以下就简单介绍我院开展的几种结核分枝杆菌的实验室检查方法。

细菌学检查有直接涂片镜检和结核分枝杆菌培养。

一、标本直接涂片染色镜检有金胺“O”荧光染色和齐-尼抗酸染色，标本可以是痰液、肺泡灌洗液、尿液、腹水、胸水等其体液标本。

金胺“O”荧光染色后，分枝杆菌在荧光显微镜下菌体成亮黄色。金胺“O”荧光染色，敏感性高，常用于初筛，阳性再用抗酸染色进行复核。

图1 金胺O荧光染色(图片来源网络)

齐-尼抗酸染色是最常用的抗酸染色，染色后分枝杆菌呈红色，背景蓝色。

图2 抗酸染色（图片来源网络）

直接涂片法操作简便快速，但受机体排菌量影响，检出率不高。特异性也不够，其他非结核的分枝杆菌和放线菌也可以染色，需要进一步进行其它实验。

二、结核分枝杆菌培养是结核病实验室诊断的金标准，分固体培养和液体培养。固体培养法，适用范围广，比涂片法检出率高，不过耗时过长，需要5到8周。

液体培养，我院采用的是MGIT 960 全自动分枝杆菌检测/药敏系统培养法，这种方法较固体培养法，操作简便，培养时间大概1个月左右。

图3  MGIT 960 全自动分枝杆菌检测/药敏系统培养法（图片谭德友提供）

培养法检出率较涂片法高，培养分离出来可以进行药物敏感实验，但是培养培养时间过长，不能满足临床实际工作中快速诊断的要求。

免疫学检查有结核杆菌抗体检测和全血干扰素测定。

一、结核杆菌抗体检测，通过检测血液、胸腹水、脑脊液等标本的结核IgG抗体，辅助结核诊断，可作为活动性结核分枝杆菌感染的快速诊断方法，血清阳性率可达80%~90%。不过存在一定的假阳性。

二、γ-干扰素释放试验（interferon-γ release assay，IGRA），通过检测结核分枝杆菌特异性抗原刺激T细胞产生的γ-干扰素（IFN-γ），来判断是否存在结核菌感染。

IGRA可用于结核潜伏感染的诊断和活动性结核的辅助诊断，特异度高，不受卡介苗接种及大多数非结核分枝杆菌的干扰；适用于疫情检测和流行病学调查。

γ-干扰素释放试验（IGRA），是世界卫生组织推荐的用于诊断结核分枝杆菌感染的体外免疫学方法，也是我国肺结核诊断标准中用于活动性结核辅助诊断的方法之一。

分子生物学检查——Xpert MTB/RIF 检测。

Xpert MTB/RIF是通过检测结核分枝杆菌基因组中的rpoB基因及其突变情况，实现结合分枝杆菌核酸和利福平耐药检测的半巢式全自动实时荧光定量核酸扩增技术。

这项技术特异性将近100%，能准确区分结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌。它比涂片法和培养法更敏感；耗时短，完成检测仅需2小时；适用多种标本，痰液、肺泡灌洗液、肺组织、脑脊液、淋巴结、关节液以及尿液等均可用于检测；同时检测利福平耐药，检测对一线抗结核药物利福平的耐药情况，可为临床用药提供参考。可以说，Xpert MTB/RIF实现了结核分枝杆菌的精准快检。

图4  Xpert MTB/RIF检测 （图片谭德友提供）

XpertMTB/RIF技术已被世界卫生组织推荐应用于肺结核、肺外结核及儿童结核的诊断。目前，该技术是WHO唯一推荐的用于结核分枝杆菌及利福平耐药快速检测产品。

结核分枝杆菌的实验室检测方法还有很多，每种方法各有千秋，也有一定的局限性，各种方法相互补充，相互印证。需要临床医生根据患者病情，联合检验，采取个体化检测治疗。

通讯员：王晓妮  一审：梁连辉